PCR分析:それは何ですか? PCR検査を正しく行うには

それほど前には、信頼性の高い、人の様々な感染症を診断する高感度で迅速な方法です。この方法はPCR分析と呼ばれています。それは何ですか、その本質は何か、どの微生物がそれを明らかにすることができるか、それを適切に手渡す方法は、私たちの記事で説明します。

発見の歴史

ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)の方法を発明した1983年にアメリカの科学者Cary Myullisに就任しました。創業者が働いた会社「Cetus Corporation」による最初の診断方法の特許を取得しました。しかし、1992年には、すべての権利と特許が "Hoffman-La Roche"社に売却されました。その後、並行して同様の研究が行われ、Alice Chen、David Edgar、John Treelなどの他のアメリカの生物学者によって記録されたようである。 1980年に、ソ連の科学者A. Slyusarenko、A. KaledinとS. Gorodetskyはこの問題を扱った。したがって、権利者を決定することは不可能でした。多くの優れた生化学者がポリメラーゼ連鎖反応法の開発に貢献し、その革新を特許取得しています。現時点では、特別に装備されたラボでPCR分析がどこでも実行されます。

PCR診断法の本質

PCR分析:それは何で、どのように機能するのですか? この方法の本質は、in vitroでの特別な酵素DNAポリメラーゼを使用して、ボリュームの特定の微生物の環境で増加するという事実にあります。これを行うには、既存のDNA材料を増やします。したがって、試料中の病原体の存在量は、生化学的実験室操作を犠牲にして増加され、細菌は、顕微鏡で検出することは困難ではないであろう。

PCR分析 - それは何ですか?

材料研究はどのように行われていますか?

分析には、

  • DNA-マトリックス;
  • 材料の断片の末端を接続するプライマー;
  • 熱安定性DNAポリメラーゼ酵素;
  • 酵素の適切な機能を保証する化学物質。
  • DNA材料の成長および発達のための適切な条件を作り出すのに必要な緩衝液。

    PCR分析12

PCRを行うために、変性、アニーリングおよび伸長の3段階からなる25〜30回の反復を行う。

ポリメラーゼ連鎖反応の分析特別な装置、すなわちアンプを使用してください。現代の装置では、チューブの加熱と冷却に必要なプログラムを設定して、診断中のエラーを排除できます。

診断はどこで使用されていますか?

ポリメラーゼ連鎖反応の方法は、医学の様々な分野で使用されている:

  • 法医学者は、髪、唾液または血液などの遺伝物質を同定するためにこれを使用します。
  • PCR血液分析は、例えば特定の薬物に対する個々の遺伝子操作された反応を検出するために、遺伝子タイピングを助ける。
  • そのような方法の助けを借りて、人々の間の家族関係の存在を確立する。
  • 最も一般的なPCR法は、様々な感染症の定義のための医学的診断法になっている。

どのような感染がPCRを明らかにするか?

だから、医学は長い間、PCRの分析に成功しています。それは何ですか、我々はすでに学んだ。それでどの病原体を検出することができますか?以下の感染症がPCRによって診断される:

  • A型肝炎、B型肝炎、C型肝炎;
  • 尿素プラズマ症;
  • カンジダ症;
  • クラミジア;
  • マイコプラズマ症;
  • gardnerellez;
  • 感染性単核球症;
  • トリコモナス症;
  • パピローマウイルス感染;
  • 結核;
  • 第1および第2タイプのヘルペス感染;
  • ヘリコバクター症;
  • サイトメガロウイルス;
  • ジフテリア;
  • サルモネラ症;
  • HIV感染。

    HIVのPCR解析

また、癌の診断にはPCR法が用いられている。

利点

診断PCRにはいくつかの利点があります。

  1. 高い感度。 微生物のわずかなDNA分子でさえ、PCR分析は感染の存在を決定する。この方法は、慢性および潜在性疾患に役立つ。このような場合、しばしば微生物は他の方法で培養されない。
  2. 研究のためには、唾液、血液、性別、毛髪、上皮細胞などの任意の物質が適している。最も一般的なものは、血液検査とPCRにおける泌尿生殖器の塗抹標本である。

    PCR:テストを受ける

  3. それは長期作物の栽培を必要としません。自動化された診断プロセスにより、4-5時間後に研究の結果を得ることができます。
  4. この方法はほぼ100%信頼性があります。偽陰性結果の単一症例のみが記録された。
  5. いくつかのタイプを識別する能力単一の材料サンプルからの病原体。これは、病気の診断プロセスをスピードアップするだけでなく、材料費を大幅に削減します。しばしば、医師は包括的なPCR分析を処方する。 6つの病原体の定義からなる検査の価格は約1500ルーブルである。

分析の準備のための推奨事項

PCR検査で信頼性の高い結果が得られるように、予備診断のための推奨事項に従って分析を行う必要があります。

  1. 唾液を放棄する前に、材料を服用する4時間前に食べ物や薬物を服用しないようにしてください。処置の直前に、沸騰した水で口をすすいでください。
  2. 頬の内面からサンプルを採取する場合は、上記の規則に従う必要があります。すすぎ後、軽い皮膚マッサージを行い、腺の分泌物を単離することが推奨される。
  3. 尿は通常、家で収穫されます。これを行うには、性器の完全なトイレを行う必要があります。滅菌プラスチック容器に50〜60mlの尿を採取する必要があります。材料の純度を保証するために、女性がタンポンを膣に挿入し、男性が皮膚を最大限に引き上げることが推奨される。あなたは月経中に材料を取ることができません。
  4. 精子には性行為を控える必要があります収集する前に3日間行動してください。また、医師はサウナの訪問や温浴、アルコールやスパイシーな食べ物の摂取を拒否するようアドバイスします。テストの3時間前に、あなたは排尿を控える必要があります。
  5. 尿生殖器スミアの送達のために、例えば分析はクラミジアPCRで実施され、女性および男性の両方が3日間の性的休息を推奨される。試験の2週間前に抗菌薬を服用しないでください。一週間は、親密なゲル、軟膏、膣座薬、シリンジの使用をやめる必要があります。テストの3時間前に、あなたは排尿を控える必要があります。月経中に、材料の収集は、泌尿生殖器の汚れを取ることができる血液排出の停止後3日後にのみ実施されていません。

妊娠中のPCR

赤ちゃんの期待の期間に多くの感染性性的伝染病は、胎児の正常な発育にとって非常に危険です。 STDは、子宮内発育遅延、流産または早産、子供の先天性奇形を引き起こす可能性があります。したがって、初期のPCR試験に合格することは非常に重要です。登録時に分析を提出する必要があります - 最大12週間。

クラミジアPCRの解析

フェンス材料は、子宮頸管に由来する特別なブラシの助けを借りて。手術は無痛で、赤ちゃんに危険をもたらすものではありません。通常、妊娠中に、クラミジアは、PCR法、尿素プラスモーション、マイコプラズマ症、サイトメガロウイルス、ヘルペスおよびパピローマウイルスによって分析される。このような検査の複合体は、PCR-6と呼ばれる。

HIV診断のためのPCR

ポリメラーゼ連鎖反応の方法反応は体の変化や診断の状態に非常に敏感で、多くの要因が結果に影響を与える可能性があります。したがって、HIV感染のPCR分析は信頼できる方法ではなく、その有効性は96〜98%である。残りの2〜4%の症例では、検査は偽陽性の結果をもたらす。

しかし、HIVのPCR診断なしの状況では管理しないでください。通常、それは偽陰性のELISA結果を有する人々に投与される。このような指標は、その人がウイルスに対する抗体をまだ発症しておらず、数が複数増加することなく検出することができないことを示している。これは、PCR法を用いて血液検査を行うことによって達成することができる。

また、この診断は、HIV陽性の母親から生まれた生後1年の子供に必要です。この方法は、子供の状態を確実に判断する唯一の方法です。

肝炎診断用PCR

ポリメラーゼ連鎖反応法は、感染に対する抗体の形成または疾患の症状の出現よりずっと前に、A型、B型、C型肝炎ウイルスのDNAを検出する。特に有効なのは、C型肝炎のPCRの分析である。なぜなら、このような疾患は無症状で進行し、タイムリーな治療を行わなくても慢性期に入るからである。

PCR血液検査

病原体の適時の検出は、合併症および長期の治療を回避するのに役立つ。

包括的なPCR調査

複雑なPCR分析:それは何ですか?マイコプラズマ・ゲニタリウム、マイコプラズマ・ホミニス、ガードネレラ・バギナリス、カンジダ、トリコモナス、サイトメガロウイルス、ウレアプラズマurealitikum、ヘルペス1および2型、淋病パピローマウイルス:同時に複数種の感染を決定することを含むこの試験方法polimezarnoy連鎖反応。この診断の価格は2,000〜3,500ルーブルの範囲です。定性的または定量:ならびに分析の種類、診療所、材料および機器に応じ。あなたのケースで必要とされている - 医師が決定します。いくつかのケースでは、あなただけの単純なHIV、定量的力価が果たした重要な役割として、他の人に病原体の存在を検出します。上記病原体検査の全ての診断における「12のPCR解析」と称します。

分析結果の説明

PCR解析のデコードは難しくありません。インジケータには「正の結果」と「負の結果」の2つのスケールしかありません。病原体が検出された場合、医師は99%の自信を持って病気の存在を確認し、患者の治療を続けることができます。対応するカラムの感染を定量する定量法では、検出されたバクテリアの数値が示されます。医師だけが病気の程度を判断し、必要な治療を処方することができます。

PCR解析に合格するには?

場合によっては、例えば、PCR法によるHIV感染が陰性となった場合、結果を確認するために追加の検査を行う必要があります。

どこで分析するのですか?

PCR分析を提出する場所:州立ポリクリンまたは私立研究室で?残念なことに、地方自治体の医療機関では、機器や方法が古くなっていることが多い。したがって、現代の設備と高度な資格のある人材を備えた私立の研究室を優先する方がよい。さらに、私立診療所では、より迅速に結果を得ることができます。

モスクワでは、多くの私立研究所が提供しています様々な感染のPCR分析を実施する。例えば、Vita、Complex Clinic、Happy Family、Uro-Proなどの診療所では、PCR解析が行われます。試験の価格は200ルーブルからです。 1つの病原体の定義について。

感染性の診断ほとんどの場合、PCRは、感染の初期段階で体内の病原体を迅速かつ確実に検出する方法です。しかし、場合によっては、他の診断方法を選択する価値があります。このような調査を実施する必要性は、専門家によってのみ決定することができます。 PCR分析のデコードには専門的なアプローチが必要です。医師の指示に従ってください。必要ではない、自分でテストしてください。

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